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Las células de Schwann (CS) son la glía de sistema nervio periférico. El diseño de prótesis nerviosas se ha centrado en la producción de CS autólogas cultivadas a partir de nervios periféricos (NP) y de ganglios de la raíz dorsal (GRD). Muy poca literatura reporta cultivo de células perineurales (CP) y fibroblastos endoneurales (FE), y no son consideradas como elementos a incluir en una prótesis. En este trabajo, se describe la importancia de la microdisección del nervio ciático y de los GRD para obtener cultivos de CS, FE y CP con 98% de purificación. Las CS crecen sobre diferentes soportes, con y sin mitógenos. Se obtuvo un porcentaje de CS elevado cuando se elimina el epineuro y perinuero de los NC y la cápsula de los GRD antes de la disociación enzimática, comparado a 70% (p≤0,003 N=4 experimentos) sin microdisección u 80% sin epineuro (p≤0,6 N=4 experimentos). Los FE se adhieren preferencialmente en las primeras 24 h y 20% de suero favorece su crecimiento. En el primer pasaje, son 100% CS o FE, siendo confluentes a los 6 y 8 días respectivamente. Las CP o de la cápsula de GRD no se disocian y no crecen en sub-cultivos, únicamente crecen a partir de explantes de perineuro; no forman monocapa sino una lámina de múltiples capas celulares. En conclusión, la microdisección del GRD y del NC es indispensable para obtener en pocos días CS, FE y CP de animales adultos en cultivos altamente purificados. Palabras Claves: Nervio ciático (NC), ganglio de la raíz dorsal (GRD), células de Scwhann (CS), células perineurales (CP), fibroblastos endoneruales (FE).