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Os cães domésticos podem ser infectados por diferentes agentes zoonóticos, assumindo uma importância epidemiológica na distribuição espacial destes agentes. O objetivo do presente trabalho foi detectar a frequência de anticorpos contra Toxoplasma gondii e B. burgdorferi lato sensu em cães domiciliados no município de Castanhal, estado do Pará, Brasil. Foram estudados 186 cães (machos= 88, fêmeas= 98) de diferentes faixas etárias (0 a 6 meses, >6 meses a 2 anos, > 2 anos). As coletas das amostras foram realizadas por conveniência em 148 animais domiciliados em bairros localizados na zona urbana e 38 cães residentes na zona rural. Anticorpos contra T. gondii e B. burgdorferi lato sensu foram detectados em 59,7% e 80,1% dos animais examinados, respectivamente. Anticorpos contra os dois agentes foram detectados em 48,4% (90/186) dos cães. Conclui-se que os cães domésticos domiciliados em áreas urbana e rural do município de Castanhal, estado do Pará, são expostos à infecção por T. gondii e B. burgodoferi lato sensu, sendo os animais com faixa etária superior a dois anos os mais frequentemente infectados.