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An in vitro system for studying the resistance response of cotton (Gossypium hirsutum L.) to Xanthomonas campestris pv. malvacearum was investigated. Cell suspension cultures, established from hypocotyl-derived callus of cotton cultivar 101-102B, were treated with bacterial extracellular polysaccharides (EPS) extracted from the incompatible race 18 of X. campestris pv. malvacearum. EPS at 600 mug/mL caused pronounced darkening of the suspension cultures, as indicative of cell death, 48 hours after incubation. Protein electrophoresis analysis of the time course of EPS-treated cells showed differential accumulation of several protein bands after 12-24 hours. The time course of protein accumulation and cell death was consistent with an elicitor-mediated hypersensitive response.<br>Desenvolveu-se um sistema in vitro para estudar a resistência do algodoeiro (Gossypium hirsutum L.) à Xanthomonas campestris pv. malvacearum. Foram utilizados calos originados a partir de hipocótilos da cultivar de algodoeiro 101-102B para estabelecer culturas de células em suspensão, as quais foram tratadas com polissacarídeos extracelulares bacterianos (EPS) extraídos da raça incompatível 18 de X. campestris pv. malvacearum. O tratamento com EPS, na concentração de 600 mig/mL, causou acentuado escurecimento das culturas em suspensão, indicativo de morte celular, 48 horas após a incubação. A análise temporal do perfil eletroforético de proteínas extraídas das células tratadas com EPS mostrou um acúmulo diferencial de diversas proteínas após 12-24 horas. O acúmulo de proteínas e a morte celular ao longo do período estudado foram consistentes com um padrão de resposta de hipersensibilidade causada por elicitores.